26年CH食品质量与安全 副地衣芽孢杆菌几丁质酶克隆表达及酶学性质研究全日制终稿(16142字).docx

III摘要本研究以来源于副地衣芽孢杆菌(Bacillus paralicheniformis)BP7-2-1 的 GH18 家族几丁质酶 Chi2497 为研究对象，构建了重组表达菌株 Escherichia coli BL21(DE3)/pET-30a(+)-Chi2497，经 IPTG 诱导表达后，采用镍柱亲和层析、离子交换层纯化获得高纯度重组几丁质酶 Chi2497。SDS-PAGE 电泳显示该酶分子量约为 65.0 kDa，与理论值一致。实验结果表明：Chi2497 的最适反应 pH 为 6.0，在 pH5.5-6.5 范围内相对酶活力维持在 80%以上；在 pH5.0-10.5 范围内孵育 30 min 后残余酶活力保持在 90%以上，表现出较宽的 pH 稳定性。最适反应...