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26年WP生物工程 谷氨酸棒杆菌转化方法系统优化18.14-AI14.64全日(22104字).docx

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WHKJ 大学本科毕业论文I摘 要谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是工业上发酵生产氨基酸及其他高附加值化学品的重要菌株,但其特殊的细胞壁结构导致遗传转化效率低下,且常用的 pK19mobsacB 自杀质粒存在蔗糖致死筛选严谨性不足的问题,严重制约了该菌株的基因编辑与代谢工程改造进程。本研究旨在系统优化谷氨酸棒杆菌电转化方法,并通过改造 pK19mobsacB 质粒增强其筛选标记的有效性,为后续基因编辑操作奠定基础。研究首先通过 PCR 扩增获得 Ptuf 强启动子,采用无缝克隆技术将其插入 pK19mobsacB 质粒的 sacB 基因上游,构建得到 pK19mobsac...

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