26年CH食品质量与安全 CelOCE纤维素辅酶同源辅酶的筛选与体外表达全日制终稿(14257字).docx

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I摘要农业废弃物中木质纤维素的有效降解是目前生物质资源化应用的一大难题。而广西是我国甘蔗种植大省，产生的甘蔗渣较多，但由于其纤维素结构紧密以及常用酶系降解效果差等原因导致无法有效利用，因此需要开发出高效的新一代降解酶制剂。本研究以一种新型纤维素氧化切割酶 CelOCE 为出发点，通过同源序列比对得到纤维素降解辅助酶 CelOCE-2,然后设计 pET-CelOCE-2 重组表达载体，在双酶切、菌落 PCR 及测序鉴定之后转入宿主菌大肠杆菌 BL21(DE3)，从而制备出 CelOCE-2 工程菌。为了增加目的蛋白的可溶性表达水平，在诱导方面进行了改进：工程菌在 37℃、200r...

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