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26年CH食品质量与安全 海洋真菌来源GH6家族纤维素酶EG22的异源表达及酶学性质研究全日制终稿(15459字).docx

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I摘要为挖掘适用于工业应用的新型纤维素酶资源,本研究以海洋真菌来源的 GH6 家族纤维素酶基因 EG22 为研究对象,经密码子优化后全合成该基因的编码序列,随后构建了毕赤酵母基因工程表达菌株 GS115-pPic9k-EG22,实现了重组酶 EG22 的高效异源表达。通过 Ni2+亲和层析获得了纯化的目标蛋白。SDS-PAGE 电泳检测显示其表观分子量约为 66 kDa,高于理论预测的分子量大小(50.4 kDa),表明重组酶 EG22 具有明显的糖基化现象。系统研究了重组酶 EG22 的酶学性质,结果表明:EG22 的最适反应温度为 60℃,在 50-65℃的反应温度范围内能够保持 80%以上的...

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