26年WH生物科学本科 拟南芥CA2过表达载体的构建及鉴定21.92-AI39.74-约12638字符(10478字).docx

摘要-I-拟南芥 CA2 过表达载体的构建及鉴定摘 要碳酸酐酶 CA2 是植物光合碳同化过程中的关键酶。为深入解析其生物学功能与调控机制，本研究以拟南芥为材料，构建了 CA2 基因的过表达载体。首先，提取野生型拟南芥总 RNA 并反转录为 cDNA，依据 CA2 基因序列设计特异性引物，通过 PCR 扩增获得目的片段。随后，选取适宜过表达载体，利用限制性内切酶对载体进行线性化处理，并通过 DNA 连接酶将 CA2 片段与载体连接，构建重组表达载体。将连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞，经抗性筛选、菌落 PCR 及酶切鉴定初步获得阳性克隆。最终，通过测序验证确认...